【多选题】
A 基本流程:构建含有可能为药物分子靶点蛋白的载体,使该蛋白与2个不同的表位标签融合表达,采用Flag-HA双标签载体;载体转染细胞并表达融合蛋白“Flag-HA-诱饵蛋白”;细胞裂解提取总蛋白,经anti-flag树脂和anti-HA树脂的两步纯化和洗脱,更大限度去除了假阳性蛋白。洗脱液进入质谱仪,分析鉴定与诱饵蛋白具有相互作用的蛋白,进而分析药物分子的靶点。
B 技术要点:(1)找与底物专一可逆结合的配基;
C (2)将配基通过共价键偶联到基质;
D (3)配基与底物吸附;
E (4)洗脱目标物。
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